Πώς να εκτελέσετε ηλεκτροφόρηση DNA σε γέλη αγαρόζης;

Εδώ θα περιγράψουμε πώς να πραγματοποιήσουμε ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης από τον ερευνητή μας στο εργαστήριο της Liuyi Biotech.

NEW12 web

Πριν από το πείραμα, πρέπει να ελέγξουμε τη συσκευή, τα αντιδραστήρια και άλλα πειραματικά υλικά και εργαλεία που χρειαζόμαστε.

Προετοιμασία πειραματικών συσκευών και υλικών

Οι συσκευές για ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης

Οριζόντια κυψέλη ηλεκτροφόρησης (δεξαμενή/θάλαμος), τροφοδοτικό ηλεκτροφόρησης μέσης και χαμηλότερης τάσης, σύστημα εικόνας και ανάλυσης gel.

Η Beijing liuyi Biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) προσφέρει διαφορετικά μοντέλα οριζόντιας κυψέλης ηλεκτροφόρησης (δεξαμενή/θάλαμος) και τροφοδοσίας, καθώς και το σύστημα τεκμηρίωσης γέλης. Τα μοντέλα της σειράς DYCP-31 προορίζονται για ηλεκτροφόρηση και τα προϊόντα της σειράς DYY είναι το τροφοδοτικό ηλεκτροφόρησης. Τα προϊόντα της σειράς WD-9413 είναι το σύστημα τεκμηρίωσης gel. Από μικρό μέγεθος τζελ 60×60 χιλιοστά έως μαζική γέλη 250×250 χιλιοστά, μπορούμε να καλύψουμε τις διαφορετικές απαιτήσεις σας για το μέγεθος τζελ. Το μοντέλοDYCP-32Cμπορεί να κάνει το τζελ να φτάσει το μέγεθος 250×250mm. ΟDYY-6Cείναι το τροφοδοτικό μας. Υποστηρίζει έξοδο 400V, 400mA, 240W, που είναι το κοινό μας προϊόν που χρησιμοποιείται από τους πελάτες μας. WD-9413BΤο Σύστημα Εικόνας & Ανάλυσης Gel χρησιμοποιείται για την ανάλυση και την έρευνα για το τζελ, τα φιλμ και τα στυπώματα μετά το πείραμα της ηλεκτροφόρησης. Είναι μια βασική συσκευή με πηγή υπεριώδους φωτός για την απεικόνιση και τη φωτογράφηση των πηκτωμάτων που βάφονται με φθορίζουσες βαφές όπως το βρωμιούχο αιθίδιο, και με πηγή λευκού φωτός για την απεικόνιση και τη φωτογράφηση των πηκτωμάτων που βάφονται με βαφές όπως το coomassie brilliant blue.

1

Τα αντιδραστήρια για ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης

1.Το μέσο: γέλη αγαρόζης

2. Το ρυθμιστικό: TAE (Tris-οξικό, EDTA, παγόμορφο οξικό οξύ) και TBE (Tris-βορικό, EDTA, βορικό οξύ).

3. Το ρυθμιστικό διάλυμα φόρτωσης: 6×DNA ρυθμιστικό διάλυμα φόρτωσης (Ειδικό για δείγμα DNA: EDAT, γλυκερίνη, κυανόλη ξυλόλης και μπλε βρωμοφαινόλης)

Η Βαφή

Η φθορίζουσα βαφή όπως EB, Gelred, goldview, GenGreen, GenView, SYBRGreen

ΟΑναλώσιμα

Ρύγχη πιπέτας αποστείρωσης (10μL), μύτες πιπέτας (200μL), μύτες πιπέτας (1000μL), σωλήνας φυγοκέντρησης 200μL\500μL\1,5 ml.

Δείκτης DNA

Παρασκευάζεται σύμφωνα με το μοριακό βάρος που θα ελεγχθεί.

Το Gel τρέχει και παρατηρεί

Αρχικά, πρέπει να ετοιμάσουμε το τζελ αγαρόζης. Η συγκέντρωση της αγαρόζης σε ένα πήκτωμα θα εξαρτηθεί από τα μεγέθη των θραυσμάτων DNA που πρόκειται να διαχωριστούν, με τα περισσότερα πηκτώματα να κυμαίνονται μεταξύ 0,5%-2%. Παίρνοντας το δικό μαςDYCP-31DNΓια παράδειγμα, μπορείτε να κάνετε χύτευση μικρής γέλης, ευρείας γέλης, μακράς πηκτής και τετράγωνης γέλης σύμφωνα με τις απαιτήσεις του πειράματος. Επιλέξτε το δίσκο γέλης που χρειάζεστε και τοποθετήστε τη χτένα και, στη συνέχεια, ρίξτε τη θερμαινόμενη γέλη αγαρόζης στη συσκευή χύτευσης γέλης.

2

Στη συνέχεια, αφού το τζελ γίνει στερεό, αφαιρέστε τη χτένα προσεκτικά και απαλά και, στη συνέχεια, βάλτε το δίσκο γέλης στη δεξαμενή ρυθμιστικού διαλύματος. Ρίξτε το ρυθμιστικό διάλυμα στη δεξαμενή ρυθμιστικού διαλύματος και βυθίστε όλη τη γέλη στο ρυθμιστικό διάλυμα. Τοποθετήστε τα δείγματα στα φρεάτια με μια τυπική πιπέτα. Συνδέστε τοDYCP-31DNμε το τροφοδοτικό ηλεκτροφόρησης σωστά και ρυθμίστε τις παραμέτρους για να λειτουργήσει το τζελ.

3

Οραματιστείτε τα θραύσματα του DNA σας σε έναν υπεριώδες transilluminator.

AΜετά την εκτέλεση του gel, μπορείτε να χρησιμοποιήσετε το μοντέλο του συστήματος εικόνας και ανάλυσης gelWD-9413Bνα παρατηρήσει, να αναλύσει και να τραβήξει φωτογραφίες για το τζελ. Η Liuyi Biotech προσφέρει επίσης UV transilluminator (UV Analyzer) για την παρατήρηση της γέλης. Διαθέτουμε μαύρο κουτί τύπου UV trμοντέλο ansilluminator (UV Analyzer).WD-9403A, 9403C, WD-9403F, φορητό μοντέλο UV transilluminator (UV Analyzer).WD-9403Bκαι χειρός UV transilluminator (UV Analyzer)WD-9403Eγια να διαλέξεις.

4

Μια εικόνα ενός τζελ μετά την ηλεκτροφόρηση

Η μάρκα Liuyi έχει περισσότερα από 50 χρόνια ιστορίας στην Κίνα και η εταιρεία μπορεί να παρέχει σταθερά και υψηλής ποιότητας προϊόντα σε όλο τον κόσμο. Μέσα από χρόνια ανάπτυξης, αξίζει την επιλογή σας!

Για περισσότερες πληροφορίες σχετικά με εμάς, επικοινωνήστε μαζί μας μέσω email[email προστατευμένο], [email προστατευμένο].


Ώρα δημοσίευσης: Απρ-29-2022